碱性磷酸酶 （大肠杆菌）（编号：BLE021-1B）

来源于大肠杆菌（E. coli）碱性磷酸酶（Phosphatase Alkaline是一种高纯度的碱性磷酸酶（ALP），通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等，在碱性条件下最为有效，该酶能催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯及磷酸三酯的水解，但能催化ATP等焦磷酸键的水解。广泛用于二抗等的标记，最终用于蛋白和核酸等的检测，也常用于去除RNA或DNA的5-末端的磷酸基，去除载体DNA片段的5-末端磷酸基，防止线状DNA自身环化。

产品名称

碱性磷酸酶（大肠杆菌）

酶学编号

EC 3.1.3.1

CAS编号

9001-78-9

来     源

大肠杆菌（E. coli ）

形     态

溶液（含50％甘油）

酶   活

10U/ml

纯   度

≥90%（SDS-PAGE）

单位定义

1个活性单位（U）是指在 25℃，pH9.6 的条件下1min内水解对硝基苯酚磷酸盐（PNPP）生成1μmol 对硝基苯酚所需的酶量

用   途

通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；

质粒DNA同时进行内切酶消化和脱磷；

通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；

去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团。

注意事项：

失活抑制：75℃加热5分钟可以使碱性磷酸酶失活。金属离子螯合剂对碱性磷酸酶有抑制作用。

底物浓度高时，本酶最适pH约为10；底物浓度低时，最适pH约为8，但特异性比高底物浓度时低。本酶在保存条件下极其稳定，而在螯合剂存在的条件下，经65℃、30分钟加热处理，99%的活性不可逆失活 (根据反应条件不同有时也有例外) 。建议失活处理时使用苯酚，可使酶完全失活

储存条件

温度：-25℃~ -5℃保存 （注：避免温度低于-25℃发生冻结；若长时间冻结会导致活性部分丧失）

有效期：24个月